CDCFDA, SE 活細胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) |
FS1197-25MG | CDCFDA, SE 活細胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE | 25mg | 1500.00 |
活細胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE
產(chǎn)品描述
活細胞熒光示蹤探針 CDCFDA, SE [5-(and-6)-Carboxy-2’,7’-dichlorofluorescein diacetate, succinimidyl ester]已被廣泛證實,用CDCFDA 活細胞綠色熒光探針標記細胞能有效確定總細胞的數(shù)量和一個樣本中存在多少活細胞。流式細胞術(shù)結(jié)合熒光染色法是分析非均質(zhì)細胞種群的有力工具。
FDA 和它的衍生物無熒光分子進入細胞后被胞內(nèi)無特異性的酯酶所水解產(chǎn)生熒光。這些熒光產(chǎn)物只能積聚在具有完整細胞膜的細胞中。因此,死細胞無完整細胞膜不能被染色。FDA 具備精que地膜轉(zhuǎn)運動力學和胞內(nèi)水解作用或者類似物(CDCFDA)相關(guān)的細胞功能,因此可以通過熒光顯微鏡或者流式細胞儀來檢測 FDA 標記的細胞。過 FDA 熒光標記的細胞在細胞系或者菌株中存在變化,可能是由于不同胞內(nèi)酯酶的活性所造成的。活細胞熒光示蹤探針 CDCFDA, 琥珀酰亞胺酯是一個胺化 FDA 衍生物,可以用來制備各種 FDA偶聯(lián)物。
產(chǎn)品屬性
英文名字: CDCFDA, SE [5-(and-6)-Carboxy-2’,7’-dichlorofluorescein diacetate, succinimidyl ester]
中文名稱: 活細胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE
分子量:626.35
光譜特性:光譜學相關(guān)參數(shù)為Ex=504nm / Em=529nm
儲存條件:4℃,避光半年,-20℃,避光長期保存
操作說明
細胞制備與染色
*的染色探針濃度取決于不同的應用程序類型,此處建議的初始條件是基于驗證的特定細胞類型,具體實驗中應摸索加以調(diào)整。測試建議至少十倍的濃度范圍內(nèi)。一般情況下,長期染色(3 天以上)或者快速分裂的細胞使用需要 5~25μM 的染料。更短的實驗,如生存能力分析,可以采用 0.5~5μM。為了減少毒性負荷,選擇盡可能低的染料濃度。
1.1 用高品質(zhì) DMSO 溶解染料至終濃度為 10mM 儲液,儲液添加至無血清培養(yǎng)基中,保持終濃度
在 0.5~25μM 的工作濃度,孵育溫度為 37 度。
1.2 對于懸浮細胞,當細胞濃度達到所需要求,即可離心收集細胞,棄上清,用預熱的染色輕柔重
懸,在細胞的生長條件下孵育 15~45分鐘后,離心。對于貼壁細胞,當達到合適匯合度后,去掉培養(yǎng)基,更換以預熱的染色液,在細胞的生長條件下孵育 15~45 分鐘。
1.3 更換新鮮預熱的培養(yǎng)基,37 度另外孵育 30 分鐘,以保證胞內(nèi)酯酶充分水解。
1.4 吸取 5μL 的染色菌液至載玻片上,加蓋 18mm 正方形蓋玻片,熒光顯微鏡觀察。
1.5 如需進行流式細胞術(shù)分析,可以收集細胞,調(diào)整細胞密度在 106/mL,按懸浮細胞孵育標記方法之
后,上流式細胞儀進行分析。
注意事項
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途
為了您的an全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。